Western Blotting und Immunodetection-Kit II

Bei der Protein-Gelelektrophorese kann nur das Molekulargewichte von Proteinen bestimmt werden. Mittels der Immunodetektion lässt sich ein bestimmtes Protein in der Probe nachweisen. Dazu werden nach der Elektrophorese die Proteine per Western Blotting vom Gel auf eine Membran transferiert, wo sie mit spezifischen Antikörpern reagieren können. Die Methode ist weitverbreitet für den diagnostischen Nachweis von HIV und BSE.

Mit dem Kit für 8 Arbeitsplätze werden Muskelproben, die mit dem Kit „Gelelektrophorese von Proteinen“ aufgetrennt wurden, entweder per Elektrotransfer mit einer Tankblotkammer oder kapillar mit einem Stapel Papierhandtücher auf eine Nitrocellulosemembran übertragen. Im nachfolgenden Immunodetektions-Schritt wird Anti-Myosin-Antikörper spezifisch an die Myosinbande des Blots gebunden und mit Farbstoffen sichtbar gemacht.

Inhalt:

Das komplette Experiment kann in 4 Unterrichtsstunden abgeschlossen werden und enthält das Material für 32 Schüler.